一、材料與方法
1、工蜂卵與蜂王卵相對存活率
把小蜜蜂巢脾綁在離地面1.5 m的樹枝上,處于自然方向。群體間離2 m,4群小蜜蜂為失王群,并通過清理蜂王卵,使其成為無王群,三群蜂為工蜂卵卵源群,四個有王群被用于蜂王卵卵源群,并保持蜂王一直存在。為收集雄蜂卵,把1塊具有卵的雄蜂巢脾用小刀刻下,用刀片把巢脾壁修整為4 mm深,并在解剖鏡下進行移卵。巢脾上用大頭針標記幾排巢房,每一排相鄰放20個同一卵源的卵。每次實驗中巢脾中均有蜂王卵和工蜂卵,并把卵放在巢房中成垂直狀態(tài)。另有一空排巢房被用于檢測是否會有卵產(chǎn)生。
2、有王群工蜂卵巢發(fā)育水平
選擇4群小蜜蜂,隨意采集不同日齡的工蜂放在含有70%乙醇的50 mL的塑料管中,保存在-20℃用于解剖檢測。
3、雄螃母體來源
收集封蓋的雄蜂和工蜂幼蟲放人含乙醇的1.5 mL的塑料管中進行微衛(wèi)星分析。蜂王基因型通過13~20只工蜂的基因型推斷。
二、結(jié)果
1、蜂王卵與工蜂卵的相對存活率:統(tǒng)計分析表明,工蜂卵的清除率與蜂王卵的清除率差異極顯著。辨認群間差異不顯著。比較發(fā)現(xiàn),工蜂卵的保存數(shù)量僅為蜂王卵的41%。另外空排巢房中沒有新的卵產(chǎn)生,說明蜜蜂沒有在實驗巢脾中產(chǎn)卵。
2、有王群中工蜂卵巢發(fā)育水平:對800只工蜂解剖發(fā)現(xiàn)沒有1只工蜂含有看得見的卵。
3、雄蜂母系來源:對564只雄蜂分析,沒有一只雄蜂含有與蜂王一樣的等位基因。假如有工蜂后代雄蜂存在,那就有蜂王的基因位點。通過假設(shè)蜂王全是每群卵的母親,算出雄蜂的基因型期望頻率,并與實測的基因型頻率進行統(tǒng)計分析。統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)差異不顯著,說明很大一部分雄蜂是蜂王的后代。通過檢測工蜂卵源培育雄蜂的概率發(fā)現(xiàn)564只樣品中只能檢測到1只雄蜂是工蜂卵源的個體。
三、討論
小蜜蜂工蜂卵快速被清理說明小蜜蜂能鑒別出丁蜂卵和蜂王卵。工蜂監(jiān)督在蜂群中存在,和西方蜜蜂中監(jiān)督機制相似,表明小蜜蜂會用蜂王信息素來標記自己所產(chǎn)的卵,工蜂也就通過這種信號來培育這種標記卵。在卵的轉(zhuǎn)移實驗中,蜂王卵的存活率比預計要低,這可能是實驗方法的原因,如卵和巢房的破壞,以及實驗巢脾出現(xiàn)導致不尋常的環(huán)境,也可能小蜜蜂卵比西方蜜蜂卵對實驗處理更敏感。微衛(wèi)星研究發(fā)現(xiàn),盡管小蜜蜂中的工蜂試著去培育自己的后代,但工蜂監(jiān)督對減少工蜂繁殖很有效。小蜜蜂工蜂卵巢缺少發(fā)育說明工蜂產(chǎn)卵的概率在有王群中還是很少,和西方蜜蜂一樣。