蜂膠的化學(xué)多樣性及標(biāo)準(zhǔn)化存在的問題
蜂膠是西方蜜蜂從植物的樹芽、樹皮等部位采集的樹脂粘液等再混合蜜蜂的舌腺、蠟腺等腺體分泌物,經(jīng)蜜蜂加工而成的一種膠狀物質(zhì)。從遠(yuǎn)古時(shí)代,民間就把蜂膠作為一種藥物來使用,直到今天在巴爾干半島上的人們?nèi)匀挥梅淠z治療傷口、燒傷、燙傷、咽喉腫痛、胃潰瘍等疾病。由于蜂膠在民間使用非常普遍,近30年來研究者對(duì)蜂膠的藥理活性及化學(xué)成分進(jìn)行了全面的研究。發(fā)現(xiàn)蜂膠具有廣泛的藥理活性:抗細(xì)菌、抗真菌、抗病毒、抗炎癥、保肝、抗氧化、抗腫瘤等,而且蜂膠化學(xué)成分主要由蜜蜂采集的植物決定,因而在不同地區(qū)、不同氣候條件下所采集的蜂膠化學(xué)成分相差很大。雖然蜂膠的生物學(xué)活性特別是抗病源微生物的活性普遍存在,但是決定其生物學(xué)活性的化學(xué)成分卻相差很大,甚至完全不同,所以“蜂膠”不是以化學(xué)成分為特征。由于蜂膠化學(xué)成分的多樣性,給蜂膠的標(biāo)準(zhǔn)化帶來很大的問題,目前蜂膠還沒有統(tǒng)一的化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。為了使蜂膠能夠被接受和認(rèn)可,更好地利用蜂膠;蜂膠必須要進(jìn)行化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化,以確保蜂膠的質(zhì)量,安全性和有效性。 1.蜂膠能否進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化蜂膠來源于植物,植物的多樣性決定了蜂膠化學(xué)成分的多樣性。按照藥用植物標(biāo)準(zhǔn)化的方法來確立蜂膠的標(biāo)準(zhǔn)化是合情合理的。藥用植物的化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化是根據(jù)其活性成分建立的,如果這些活性成分巳經(jīng)被認(rèn)可和接受,那么必須通過合適的分析方法對(duì)活性成分進(jìn)行量化;如果這些活性成分還不清楚或尚在研究之中,那么就把總提取物作為活性成分,在這種情況下,必須用標(biāo)記化合物來進(jìn)行質(zhì)量控制。對(duì)于蜂膠的活性成分以及其中的一些最重要的活性成分如咖啡酸苯乙酯(CAPE)的研究已經(jīng)積累了一定的知識(shí),但是在大多數(shù)熱帶地區(qū)蜂膠中不含有CAPE或者含量很少,CAPE就不可能被用作標(biāo)記化合物來進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化,對(duì)于蜂膠的其他活性成分而言,問題也是一樣的。在這種情況下,對(duì)蜂膠進(jìn)行完全標(biāo)淮化是不現(xiàn)實(shí)的。根據(jù)蜂膠的植物來源和化學(xué)成分對(duì)蜂膠的某些方面進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化還是可行的。
2.蜂膠的植物來源決定蜂膠的化學(xué)類型
蜂膠的植物來源決定蜂膠的化學(xué)成分。綜合考慮蜂膠的植物來源、化學(xué)成分和生物學(xué)活性規(guī)律,可以為具有明確化學(xué)成分和生物學(xué)活性的蜂膠類型進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。此外還有其他的蜂膠化學(xué)類型。例如,在地中海地區(qū)發(fā)現(xiàn)的一種蜂膠主要成分是二游烯酸;在巴西,除了綠蜂膠外還有11種其他類型的蜂膠。在蜂膠標(biāo)準(zhǔn)化進(jìn)程中,對(duì)于每一種蜂膠的化學(xué)成分、生物學(xué)活性以及植物來源都要有詳細(xì)的、可靠的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較,這樣才能確定在某些特定地區(qū),應(yīng)用哪一種蜂膠類型作為該地區(qū)蜂膠標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)范的最佳選擇。
3."楊屬型"蜂膠標(biāo)準(zhǔn)化的建立
就藥理活性和化學(xué)成分而言,“楊屬型”蜂膠是所有蜂膠類型中研究最全面的一種。通過對(duì)楊屬滲出物的化學(xué)成分的分析,Bankova等選擇了7種酚酸類作為標(biāo)記化合物,通過薄層層析(TLC)方法,建立了簡(jiǎn)單快速的分析程序,能夠把楊屬型蜂膠與其他類型的蜂膠相區(qū)分開來。
如果一種特定的蜂膠樣本被鑒定出屬于“楊屬型”蜂膠,那么就可以確定其生物學(xué)活性成分,然而在“楊屬型”蜂膠中有超過25種酚酸類物質(zhì)具有不同的生物學(xué)活性,所以測(cè)定每一種活性成分的含量是非常困難的,Borwehi等研究“楊屬型”蜂膠的抗菌活性(對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC)和各種活性成分所占的比例的相關(guān)性時(shí)發(fā)現(xiàn),沒有一種單一成分活性會(huì)超過Pear-son~Lee值,因此推測(cè),發(fā)揮生物學(xué)活性的物質(zhì)是一類擁有相同或相近化學(xué)結(jié)構(gòu)的多種物質(zhì)。“楊屬型”蜂膠的化學(xué)成分可以通過三個(gè)參數(shù)來表示:總黃酮和黃酮醇、總黃烷酮和黃烷酮醇、總酚酸類,并且通過分光光度法可以快速定量測(cè)出“楊屬型”蜂膠中這三類主要活性物質(zhì):通過氯化鋁復(fù)合物的形成可以定量測(cè)定總黃酮/黃酮醇;通過2,4-二硝基酚(DNP)比色法定量測(cè)定總黃烷酮和黃烷酮醇:通過福林一喬卡梯奧(Folin—Ciocalteu)反應(yīng)測(cè)定總酚酸類。該方法測(cè)定結(jié)果的精確性為84-109%,標(biāo)準(zhǔn)差0.5-6.2%。
Bankova等根據(jù)上面的方法分析了來自歐洲和中東地區(qū)114種“楊屬型”蜂膠活性成分,并且測(cè)定對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC。結(jié)果表明:“楊屬型”蜂膠中黃酮/黃酮醇含量為8土4%,黃烷酮/黃烷酮醇6±2%,總酚酸類28土9%,對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC211±132,^/mlo研究還發(fā)現(xiàn),總酚酸類含量與對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC之間存在明顯的負(fù)相關(guān),也就是說總酚酸類含量越高,MIC越低(P=0.003)。
4.結(jié)論
在蜂膠標(biāo)準(zhǔn)化進(jìn)程中,根據(jù)蜂膠的植物來源確定蜂膠類型已經(jīng)取得了一定的進(jìn)展,但是還有許多工作需要做。特別是必須確保對(duì)蜂膠生物學(xué)活性研究結(jié)果的可靠性,只有準(zhǔn)確可靠的研究結(jié)果才有助于推進(jìn)蜂膠的化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化,有助于人們更好地利用和使用蜂膠,最終建立各種類型蜂膠的標(biāo)準(zhǔn)化。
參考文獻(xiàn) 1.聊城大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,山東聊城252059;2.杭州師范學(xué)院設(shè)備與實(shí)驗(yàn)室管理處,浙江杭州310012
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