美洲幼蟲(chóng)腐臭病，簡(jiǎn)稱(chēng)美幼病，英文縮寫(xiě)AFB，是一種蜜蜂傳染性疾病，由類(lèi)幼蟲(chóng)芽孢桿菌(最初定名為幼蟲(chóng)芽孢桿菌)引起，這種病菌屬革蘭氏陽(yáng)性的產(chǎn)芽孢厭氧菌。感染此病的蜜蜂個(gè)體在幼蟲(chóng)和蛹階段，先變黃，再變黑直至腐爛，產(chǎn)生大量粘性物質(zhì)殘留在蜂巢內(nèi)壁上，造成污染。美幼病是為數(shù)不多的能夠毀滅整群蜂的嚴(yán)重病害之一，加之病原菌孢子壽命長(zhǎng)，預(yù)防和控制美幼病非常困難。從20世紀(jì)50年代開(kāi)始，在美國(guó)防治這種病害的唯一方法是使用一種叫“土霉素”的抗生素(簡(jiǎn)稱(chēng)OTC，一種四環(huán)素類(lèi)抗生素)，當(dāng)時(shí)這種藥品的商品名為“土霉素”。土霉素在溶液中很容易分解，因此有人認(rèn)為這種藥可能不會(huì)污染蜂蜜。

最近，美國(guó)的很多蜂農(nóng)發(fā)現(xiàn)用土霉素防治美幼病的效果越來(lái)越差。Miyagi等研究證明，從患有美幼病的幼蟲(chóng)體內(nèi)提取的類(lèi)芽抱桿菌的幼蟲(chóng)出現(xiàn)了抗土霉素的變種，試驗(yàn)所用子脾是1998年從明尼蘇達(dá)州的蜂群抽取的，土霉素對(duì)抽樣蜂群的治療效果很差。

為了應(yīng)對(duì)不斷發(fā)生的類(lèi)芽抱桿菌藥物抗性事件，多年來(lái)美國(guó)農(nóng)業(yè)部已經(jīng)對(duì)可選用的抗生素進(jìn)行仔細(xì)篩選。1970年，泰樂(lè)菌素首次被報(bào)道作為治療美幼病的候選藥物。Moffett等發(fā)現(xiàn)在蔗糖糖漿中摻入少量泰樂(lè)菌素飼喂感染美幼病的蜂群，32天內(nèi)患病蜂群康復(fù)，對(duì)感病蜂群進(jìn)行l(wèi)周2次的治療(共進(jìn)行12次)，到次年7月所試蜂群未復(fù)發(fā)。用乳酸泰樂(lè)菌素治療患病蜂群，可采用兩種飼喂方法：加入糖水中飼喂蜂群和加在煉糖飼喂。采用上述方法對(duì)感病蜂群每周治療1次，至少3周，大部分美幼病群得到控制。總體來(lái)說(shuō)，直接飼喂要比噴灑效果更好。對(duì)于患病嚴(yán)重的蜂群康復(fù)之后，應(yīng)再堅(jiān)持使用，按每群1 g乳酸泰樂(lè)菌素的劑量至少使用3周(每周1次)。按照以上劑量治療患病蜂群，25群只有2群在秋季再次出現(xiàn)輕微感染，可能是由于治療時(shí)間少于3周的緣故。Hitchcock 等又進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)，對(duì)患病蜂群施以更小劑量的酒石酸泰樂(lè)菌素，即治療一次所用的泰樂(lè)菌素量為每群0.25 g或0.1 g，縮短治療間隔時(shí)間，大約每3天1次，大約7周，結(jié)果對(duì)美幼病的療效達(dá)到100％。

泰樂(lè)菌素對(duì)成年蜂無(wú)毒副作用，對(duì)蜜蜂幼蟲(chóng)的毒性也小于土霉素。通過(guò)在實(shí)驗(yàn)室中對(duì)未成年工蜂進(jìn)行藥效試驗(yàn)，證實(shí)蜜蜂幼蟲(chóng)耐藥性很大，所能忍耐食物中抗生素的劑量為0.005％～0.04％。實(shí)驗(yàn)室研究表明食物中摻人的孢子達(dá)到一個(gè)非正常量(每毫升含1.5×108個(gè)孢子)，中度劑量的泰樂(lè)菌素就可以防止蜜蜂小幼蟲(chóng)感染類(lèi)芽孢桿菌。在治療過(guò)程中增加抗生素的劑量，雖然對(duì)幼蟲(chóng)和蛹的發(fā)育影響不大，但不能達(dá)到致死濃度(＞0.05％)。煉糖中泰樂(lè)菌素更易被采集蜂取食，最高可達(dá)800 mg/7g 糖。當(dāng)分別用20 mg，100 mg，200 mg，400 mg和800 mg的濃度進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，未發(fā)現(xiàn)對(duì)蜂群產(chǎn)生負(fù)面影響，其中一定劑量范圍的泰樂(lè)菌素對(duì)美幼病的治療效果與標(biāo)準(zhǔn)劑量的四環(huán)素(200 mg)相當(dāng)。200 mg的四環(huán)素或100 mg的泰樂(lè)菌素均能預(yù)防美幼病，最長(zhǎng)達(dá)3周，而200 mg的泰樂(lè)菌素則可達(dá)到4周。100 mg以上劑量的泰樂(lè)菌素完全可以治療感染美幼病的蜂群。野外實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出，每群蜂飼喂200 mg泰樂(lè)菌素可以預(yù)防蜂群感染美幼病達(dá)4周之久，再次飼喂同樣劑量的泰樂(lè)菌素可預(yù)防美幼病的時(shí)間更長(zhǎng)，并且受蜂群和季節(jié)因素的影響，泰樂(lè)菌素有效控制時(shí)間要比四環(huán)素長(zhǎng)33％。

泰樂(lè)菌素可以有效的控制AFB病菌對(duì)土霉素的抗性問(wèn)題，而不會(huì)引起成年蜂和幼蟲(chóng)的死亡。Elzen等發(fā)現(xiàn)在美幼病的最初治療階段，每周飼喂1次20 g精制細(xì)砂糖中添加200 mg泰樂(lè)菌素(最佳比例)劑量，飼喂3周，45天內(nèi)蜂群的癥狀明顯減輕，治愈后蜂群6個(gè)月未發(fā)現(xiàn)再次感染。而且用多種高劑量的泰樂(lè)菌素(20 g精制細(xì)砂糖中添加600 mg或1000 mg泰樂(lè)菌素)持續(xù)飼喂蜂群3個(gè)繁殖周期，與對(duì)照組相比沒(méi)有出現(xiàn)死亡率明顯升高的現(xiàn)象。試驗(yàn)采用另一種治療方法進(jìn)行驗(yàn)證，即利用混有泰樂(lè)菌素的煉糖拌人植物油制成小餅飼喂，泰樂(lè)菌素的劑量與前種方法相同，這種方法同樣可以有效地控制美幼病的癥狀，但是蜂巢小甲蟲(chóng)(Aethina tumida MuDay)的數(shù)量明顯增加。由于蜂巢小甲蟲(chóng)對(duì)蜂群具有破壞性，這種方法沒(méi)有得到權(quán)威機(jī)構(gòu)的認(rèn)可。所以還是在白砂糖中直接添加泰樂(lè)菌素的方法更為可取。

A1ippi 等對(duì)采自不同地區(qū)的67個(gè)類(lèi)芽抱桿菌樣品進(jìn)行泰樂(lè)菌素的敏感性測(cè)定，確定了它們的最小抑菌濃度(MIC，在培養(yǎng)狀態(tài)下，抗生素能夠抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最低濃度)。MIC值范圍是0.0078～0.5 μg/mL，這是所有AFB病原菌的分離菌均不能對(duì)泰樂(lè)菌素產(chǎn)生抗性的最低值。

補(bǔ)充試驗(yàn)對(duì)100 mg和200 mg劑量的泰樂(lè)菌素進(jìn)行了評(píng)價(jià)，證實(shí)泰樂(lè)菌素實(shí)際用量與糖的最適比例。將泰樂(lè)菌素加入到20g精制細(xì)砂糖中，每隔7天飼喂蜂群1次，共飼喂3次。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)45天，200 mg劑量組控制了抗性，而l00 mg劑量組未完全控制抗性。100 mg劑量組的10群蜂中有1群出現(xiàn)癥狀。所以，200 mg泰樂(lè)菌素每隔7天飼喂1次，共飼喂3次為最適劑量。

Kockansky 等對(duì)溶解于蔗糖糖漿中的泰樂(lè)菌素和土霉素的穩(wěn)定性進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)在34℃黑暗條件下，溶于高純蔗糖糖漿中的土霉素的半衰期為7天(半衰期為物質(zhì)降解50％所用的時(shí)間)；而泰樂(lè)菌素的穩(wěn)定性明顯較高，其半衰期為186天。泰樂(lè)菌素復(fù)合物(泰樂(lè)菌素和其降解產(chǎn)物混在一起)的半衰期則更長(zhǎng)，達(dá)到287天。溶于商品化蔗糖糖漿中的抗生素相對(duì)較低，土霉素的半衰期為6.3天，泰樂(lè)菌素的半衰期為75天。這些抗生素溶于高純化和商品化的蔗糖糖漿中所表現(xiàn)出來(lái)的穩(wěn)定性差異可能是金屬離子污染的緣故，例如鐵和銅離子可以顯著催化生物材料發(fā)生氧化反應(yīng)。 　　

泰樂(lè)菌素和蜂蜜混合經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間放置后，測(cè)定其中泰樂(lè)菌素殘留物的穩(wěn)定性。利用液體層析法分析，從稀釋的蜂蜜中提取殘留物。發(fā)現(xiàn)泰樂(lè)菌素經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間放置之后轉(zhuǎn)化為脫碳酶糖泰樂(lè)菌素(desmycosin)，其半衰期在34℃時(shí)大約4個(gè)月。 　　

蜂蜜中的脫碳酶糖泰樂(lè)菌素似乎更加穩(wěn)定，并且這兩種抗生素的總量在9個(gè)月后并未明顯減少。因此，利用泰樂(lè)菌素治療美幼病時(shí)要謹(jǐn)慎，以免其殘留物持續(xù)污染蜂蜜。

AFB病原菌對(duì)土霉素的抗性不斷發(fā)生，說(shuō)明大量使用抗生素會(huì)降低其使用周期，在使用泰樂(lè)菌素過(guò)程中也應(yīng)考慮以上情況。多年來(lái)，特拉霉素作為一種預(yù)防美洲幼蟲(chóng)腐臭病的藥物，而不是作為治療性的藥物。

2005年10月在美國(guó)，泰樂(lè)菌素(實(shí)際上為酒石酸泰樂(lè)菌素)被推薦用于預(yù)防蜂群美洲幼蟲(chóng)病，但它還不能作為一種治療性的方法。其主要的使用方法如下：將200 mg酒石酸泰樂(lè)菌素混入20 g糖粉中，立即撒在于脾上部邊框上緣，每周治療1次，連續(xù)3周。 　　

彭文君 譯自《蜜蜂集錦》2008年第11期 　　

《中國(guó)蜂業(yè)》2009，59（3）