中國(guó)狄斯瓦螨(Varroa destructor大蜂螨)研究進(jìn)展
狄斯瓦螨(Varroa destructor Anderson & Trueman 2000,通稱“大蜂螨”)是對(duì)世界養(yǎng)蜂業(yè)威脅最大的蜜蜂病蟲(chóng)害。2000年重新命名之前,它一直被稱為雅氏瓦螨(Varroa jacobsoni Oudemans 1904)。2000年初,澳大利亞安德森(Denis L.Anderson)對(duì)采集自亞洲各地東方蜜蜂(蜂螨原始寄主)和世界各地西方蜜蜂的大量大蜂螨樣本進(jìn)行線粒體(mtDNA)測(cè)序的綜合研究。結(jié)果表明:原被歸入雅氏瓦螨的東方蜜蜂寄生螨,應(yīng)劃分為2個(gè)種,一個(gè)是新界定的雅氏瓦螨,主要分布在印尼和馬來(lái)西亞,已發(fā)現(xiàn)9個(gè)基因型;另一個(gè)是新定名的狄斯瓦螨,分布于亞洲大陸的東方蜜蜂和世界各地的西方蜜蜂,已發(fā)現(xiàn)11個(gè)基因型。為害全世界西方蜜蜂的是狄斯瓦螨的2個(gè)基因型,即朝鮮基因型和日本/泰國(guó)基因型。其中狄斯瓦螨的朝鮮基因型分布廣泛,危害歐洲、非洲、亞洲、美洲和新西蘭的西方蜜蜂,日本/泰國(guó)基因型只分布于日本、泰國(guó)和南北美。從目前的研究結(jié)果來(lái)看,我國(guó)的大蜂螨屬于狄斯瓦螨,沒(méi)有發(fā)現(xiàn)雅氏瓦螨。
狄斯瓦螨(大蜂螨)最初是亞洲東方蜜蜂(Apis cerana Fabr.)的寄生蟲(chóng),廣泛分布在亞洲各地的東方蜜蜂群中,就連嚴(yán)寒的俄羅斯遠(yuǎn)東地區(qū)東方蜜蜂巢內(nèi)也有發(fā)現(xiàn)(1952年)。在長(zhǎng)期協(xié)同進(jìn)化的過(guò)程中,大蜂螨已經(jīng)與寄主形成近似共生的相互適應(yīng)關(guān)系,在東方蜜蜂群中大蜂螨的寄生率很低,一般情況下為害也不明顯。
這種螨類真正受到人們的關(guān)注是它成為意大利蜂(A. mellifera ligustica)等西方蜜蜂的寄生蟲(chóng)以后。20世紀(jì)初西方蜜蜂引入亞洲,大蜂螨有機(jī)會(huì)與意大利蜂等相接觸,逐漸轉(zhuǎn)移到意大利蜂體上寄生,1952年前蘇聯(lián)首次報(bào)道在其遠(yuǎn)東地區(qū)的西方蜜蜂群中發(fā)現(xiàn)大蜂螨的侵染。60~70年代后,由于地理擴(kuò)散和引種不慎等原因,大蜂螨由亞洲傳播到歐洲、美洲、非洲,就連近40年來(lái)一直禁止任何蜜蜂進(jìn)口的新西蘭也于2000年發(fā)現(xiàn)大蜂螨。如今除澳大利亞、夏威夷和非洲的部分地區(qū)還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)大蜂螨外,全世界只要有蜜蜂生存的地方就有大蜂螨的存在。
大蜂螨在我國(guó)最早的發(fā)現(xiàn)時(shí)間無(wú)確切記載。1957年前后,首先在江浙一帶飼養(yǎng)的意大利蜂群里發(fā)生危害,1960年后迅速傳播蔓延到全國(guó)各地,對(duì)我國(guó)的養(yǎng)蜂業(yè)造成極大的威脅。
大蜂螨靠吸食蜜蜂成蜂和幼蟲(chóng)的血淋巴生存,受螨危害的幼蟲(chóng)瀕于死亡,羽化的幼蜂體質(zhì)衰弱、畸形、壽命縮短,整個(gè)蜂群失去生產(chǎn)能力,如果不用藥物防治,1~2年內(nèi)就會(huì)全群覆沒(méi)。此外,大蜂螨會(huì)作為病原攜帶者,傳播細(xì)菌病和病毒病等,加快了蜂群的滅亡。因此對(duì)于大蜂螨的研究是蜜蜂病蟲(chóng)害研究的一個(gè)經(jīng)久不衰的主題?,F(xiàn)將近年來(lái)我們項(xiàng)目組在大蜂螨研究方面的進(jìn)展介紹如下。
1 大蜂螨在中蜂群寄生情況的流行病學(xué)調(diào)查
1.1 我國(guó)主要中蜂飼養(yǎng)區(qū)大螃螨的寄生狀況
1.1.1 方法
我們與各省、地、市養(yǎng)蜂管理站合作,對(duì)我國(guó)20個(gè)主要中蜂分布省區(qū)野生和人工飼養(yǎng)中蜂群的大蜂螨寄生率及對(duì)蜂群危害進(jìn)行調(diào)查,同時(shí)確定有代表性的地區(qū)開(kāi)展中蜂周年消長(zhǎng)規(guī)律觀察。
1.1.2 結(jié)果與小結(jié)
1.1.2.1 中蜂群中大蜂螨的寄生率很低,雄蜂房?jī)?nèi)一般不高于5%,成蜂身上不易看到寄生螨。但在云南西雙版納春繁季節(jié),雄蜂房中大蜂螨自然寄生率平均15%,最高達(dá)26%;工蜂房平均6%,最高達(dá)11%。
1.1.2.2 我國(guó)從南到北中蜂群中螨的寄生率呈遞減趨勢(shì)。繁殖季節(jié)在廣東、福建、云南南部和海南很容易找到大蜂螨,而在江蘇無(wú)錫、湖北祟陽(yáng)、安徽歙縣和北京的中蜂群中難以尋覓到螨的蹤影。這可能與北方的蜂群繁殖季節(jié)相對(duì)較短而越冬期較長(zhǎng),螨的數(shù)量極低有關(guān)。但意想不到的是2005年夏季在甘肅省的中蜂群里找到了大蜂螨。
1.1.2.3 在廣東發(fā)現(xiàn)蠟對(duì)蜂群有危害,螨害蜂群幼蟲(chóng)羽化率降低,成蜂死亡率增高,群勢(shì)下降,整個(gè)蜂群瀕于滅亡。則阿壩地區(qū)也有人發(fā)現(xiàn)過(guò)大蜂螨對(duì)中蜂群造成危害的現(xiàn)象。但我們發(fā)現(xiàn)其它地區(qū)在大蜂螨寄生率與廣東相似的情況下,卻未見(jiàn)對(duì)蜂群有明顯危害。各地危害程度的不同是否與螨的基因型差異有關(guān)系,值得進(jìn)一步探討。
1.1.2.4 大蜂螨在新法飼養(yǎng)的中蜂群中較難找到,在老式蜂桶或自然野生蜂群中較易發(fā)現(xiàn)。2006年我們?cè)谒拇ㄊ“蔚貐^(qū)的馬爾康,就是在舊碉堡磚縫的一群野生中蜂中發(fā)現(xiàn)了大蜂螨。
1.2 中蜂大蜂螨周年消長(zhǎng)規(guī)律的調(diào)查
1.2.1方法
福建省永定縣自然生態(tài)條件良好,有飼養(yǎng)中蜂的傳統(tǒng),是福建省主要中蜂飼養(yǎng)區(qū)。我們通過(guò)對(duì)大蜂螨寄生率以及當(dāng)?shù)卦缕骄鶜鉁?、相?duì)濕度、主要蜜源植物和蜂群群勢(shì)等因素的調(diào)查,初步了解大蜂螨在中蜂群中的種群消長(zhǎng)規(guī)律。(見(jiàn)圖l-2-1)
圖1-2-1 大蜂螨周年消長(zhǎng)與環(huán)境的關(guān)系
1.2.2結(jié)果與小結(jié)
1.2.2.1 從2003~2004年月平均氣溫和相對(duì)濕度看,外界的溫濕度對(duì)螨的周年消長(zhǎng)影響不大。因?yàn)轵钤诜淙褐?,蜂箱?nèi)的小氣候是相對(duì)恒定的。
1.2.2.2 由于大蜂螨只能在中蜂群的雄蜂房中繁殖,所以蜂群的繁殖規(guī)律和雄蜂房的數(shù)量直接影響螨種群的消長(zhǎng)。當(dāng)蜂群中出現(xiàn)雄蜂房時(shí),螨數(shù)量增長(zhǎng),雄蜂房數(shù)最多時(shí),螨達(dá)到增殖高峰,種群數(shù)量和寄生率也隨之達(dá)到最高。夏季3個(gè)月沒(méi)有雄蜂房,螨停止繁殖,種群數(shù)量下降,蜂群中就難以見(jiàn)到螨。當(dāng)秋季蜜源開(kāi)花,蜂群中出現(xiàn)部分雄蜂房時(shí),螨的數(shù)量增殖和寄生率又有所上升。
1.2.2.3 螨的消長(zhǎng)也和群勢(shì)有關(guān),春季是繁殖季節(jié),群勢(shì)增長(zhǎng)比較快,群中雄蜂房多,這時(shí)螨的寄生率就比較高(圖1-2-1)。
1.3 埋葬現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)
據(jù)研究報(bào)道,當(dāng)東方蜜蜂發(fā)現(xiàn)封蓋房中有螨寄生時(shí)。它們的第一反應(yīng)是打開(kāi)巢房,然后檢查幼蟲(chóng),如果螨離開(kāi)打開(kāi)的巢房,蜜蜂就會(huì)將巢房再封上;如果螨停留在幼蟲(chóng)房里,蜜蜂便移走幼蟲(chóng)。1998 Ra2h報(bào)道蜜蜂對(duì)幼蟲(chóng)房的螨,除了開(kāi)蓋并移走之外,還有第二個(gè)策略“埋葬”。前者清理了蜂群中的寄生蟲(chóng),后者在巢房中封閉并“埋葬”寄生蟲(chóng)。東方蜜蜂對(duì)于僅有1只螨侵入的雄蜂房多采用清理的方式,而對(duì)于一個(gè)巢房中有2個(gè)或更多的螨侵入時(shí),多采用“埋葬”的方式。有人發(fā)現(xiàn)在一個(gè)死亡的雄蜂蛹房里可以有10~28個(gè)死亡的螨。雖然多個(gè)蠟侵染的巢房可以促進(jìn)螨的遺傳多樣性,增加雜交機(jī)會(huì),但增加了被埋葬的風(fēng)險(xiǎn)?!奥裨帷毙袨榭赡苁球谥蟹淙褐邪l(fā)展受到限制的一個(gè)主要因素。
2006年8月我們?cè)谒拇ㄊ毰d縣調(diào)查采樣時(shí),在一個(gè)老式蜂桶里看到了這個(gè)現(xiàn)象。一個(gè)雄蜂房中除有一只死亡的雄蜂蛹外,一般有8~10只死亡并且已經(jīng)干癟的雌螨。2002年4月在云南西雙版納觀察到,在燃害較嚴(yán)重的蜂群中,有27%的雄蜂子由于多達(dá)10個(gè)以上母螨和子代雌成螨的寄生,在出房前就殘翅死亡,封蓋房中的螨也同歸于盡。中蜂用這種方式,埋葬了大量有繁殖能力的雌螨,從而使螨的寄生率在中蜂群中增長(zhǎng)緩慢。
2 大蜂螨在不同寄主間的繁殖特性差異研究
繁殖力是大蜂螨種群增長(zhǎng)的關(guān)鍵。以往認(rèn)為,大蜂螨在意蜂群中不但能在雄蜂房繁殖,而且可以在工蜂房繁殖,而在原始寄主東方蜜蜂群中只能在雄蜂房中繁殖,在工蜂房中不育。但已有一些研究結(jié)果顯示:寄生在意蜂群和東方蜜蜂群中的大蜂螨本身就是有差異的。鑒于此,我們對(duì)不同寄主蜂種來(lái)源的大蜂螨在不同種蜜蜂的幼蟲(chóng)房里的繁殖能力分別進(jìn)行比較觀察,從而重新認(rèn)識(shí)大蜂螨的繁殖特性,為研究蠟的遺傳學(xué)差異提供了佐證。
2.1 方法
我們分別將來(lái)自意蜂的螨移接到意蜂和中蜂的雄蜂房和工蜂房里,將來(lái)自中蜂的螨移接到意蜂和中蜂的雄蜂房和工蜂房里,在人工培養(yǎng)條件下比較它們的繁殖差異。由于中蜂螨數(shù)量太少,所以中蜂螨在中蜂群的繁殖情況,在云南西雙版納用蜂群調(diào)查的方式來(lái)完成。在調(diào)查過(guò)程中,獲得的中蜂螨,移接到意蜂的雄蜂和工蜂房里完成試驗(yàn)的后半部分。
2.2 結(jié)果
2.2.1 意蜂大蜂螨移接意蜂和中蜂幼蟲(chóng)房的繁殖狀況
對(duì)來(lái)自意蜂群大蜂螨移接意蜂和中蜂幼蟲(chóng)房的繁殖狀況的觀察數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示:螨在這四種巢房中都能正常繁殖,值得注意的是螨在中蜂雄蜂房中產(chǎn)生后代的平均數(shù),顯著高于螨在其它三種巢房產(chǎn)生后代的平均數(shù)。
2.2.2 中蜂大蜂螨移接意蜂和中蜂幼蟲(chóng)房的繁殖狀況
結(jié)果顯示:中蜂的螨只能在中蜂的雄蜂房里繁殖,(自然)繁殖率為92.5%,中蜂螨也會(huì)進(jìn)入中蜂工蜂房,但100%不繁殖。將中蜂的螨接入意蜂幼蟲(chóng)房,螨在意蜂的雄蜂房和工蜂房中都不能繁殖。
2.3 小結(jié)
2.3.1 來(lái)自意蜂群的大蜂螨在意蜂和中蜂群的雄蜂房和工蜂房里都能繁殖,同時(shí)螨在中蜂的雄蜂房中產(chǎn)生后代的平均數(shù)顯著高于其在中蜂工蜂房、意蜂雄蜂房和意蜂工蜂房產(chǎn)生后代的平均數(shù),即螨在其原始寄主的雄蜂房里繁殖力最強(qiáng)。說(shuō)明在4種類型的巢房都存在時(shí),它還是對(duì)原始寄主的雄蜂房最適應(yīng),這是大蜂螨和蜜蜂長(zhǎng)期協(xié)同進(jìn)化的結(jié)果。
2.3.2 以往的研究結(jié)果一般籠統(tǒng)地認(rèn)為,大蜂螨在意蜂群中不但能在雄蜂房繁殖,而且可以在工蜂房繁殖,而在原始寄主東方蜜蜂群中只能在雄蜂房繁殖,沒(méi)有提及大蜂螨的來(lái)源,我們將來(lái)自云南西雙版納中蜂的螨接種蜂群觀察,所得的研究結(jié)果,與前人的報(bào)道相比有新的進(jìn)展。我們發(fā)現(xiàn):在人工感染條件下來(lái)自中蜂的大蜂螨只能在中蜂雄蜂房里繁殖,在中蜂的工蜂房和意蜂的雄蜂和工蜂房里都不能繁殖。
以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明來(lái)自意蜂的螨和來(lái)自中蜂的螨,它們的繁殖特性差異很大。這個(gè)有關(guān)大蜂螨繁殖生物學(xué)研究的新發(fā)現(xiàn),豐富了我們對(duì)大蜂螨的認(rèn)識(shí),表明了寄生于東方蜜蜂群(云南西雙版納)的螨和寄生于意蜂群的螨不是一個(gè)種類,它們是在遺傳學(xué)上有明顯差異的兩個(gè)類群。
2.3.3 在中蜂群中螨的種群數(shù)量增長(zhǎng)很慢,為害水平較低,其原因除了中蜂強(qiáng)大的清理行為外,螨本身只能在雄蜂房中繁殖的局限性也起了很重要的作用??傊蠓潋诜淙褐蟹敝衬芰Φ膹?qiáng)弱是大蜂螨與蜜蜂共同作用的結(jié)果。
2.3.4 既然意蜂的螨可以在中蜂的的幼蟲(chóng)房里繁殖,可是為什么在自然侵染的情況下,即使東方蜜蜂群和意蜂群距離很近,偶爾在東方蜜蜂群里也能發(fā)現(xiàn)意蜂螨,但是尚未見(jiàn)到意蜂蠟在東方蜜蜂群繁殖的報(bào)道?這可能與中蜂對(duì)附著于蜂體和潛入幼蟲(chóng)房的意蜂螨具有強(qiáng)大的清掃能力有關(guān),對(duì)此尚有待進(jìn)一步深入研究。
3 蜜蜂對(duì)大蜂螨侵染的抵御反應(yīng)研究
3.1 蜜蜂巢房大小對(duì)大蜂螨繁殖行為的影響
由于大蜂螨只能在封蓋幼蟲(chóng)房里繁殖,影響螨在幼蟲(chóng)房中繁殖能力的因子,直接關(guān)系螨在蜂群中的增長(zhǎng)速度和螨的為害力,因此,倍受人們關(guān)注。
3.1.1 方法 我們?cè)谘芯恐幸馔獾匕l(fā)現(xiàn),秋季蜂王在雄蜂房中產(chǎn)工蜂卵。雄蜂的巢房明顯大于工蜂的巢房,在存在的工蜂幼蟲(chóng)日齡相同時(shí)情況下,兩種巢房?jī)?nèi)的實(shí)際空間是有差別的。我們趁機(jī)在這樣的巢房中人工接人大蜂螨,比較了大蜂螨侵入后,在有工蜂幼蟲(chóng)的工蜂房和有工蜂幼蟲(chóng)的雄蜂房?jī)?nèi)繁殖的差異。以期進(jìn)一步認(rèn)識(shí)巢房大小與螨繁殖力的關(guān)系。
3.1.2 結(jié)果與小結(jié) 大蜂螨在小空間的工蜂巢房中的繁殖百分率以及每只雌螨平均產(chǎn)出后代數(shù),都極顯著高于空間較大的雄蜂巢房。
在養(yǎng)蜂生產(chǎn)中,如果用內(nèi)部空間較大的新巢房培育蜜蜂的幼蟲(chóng),育出的成蜂個(gè)體相對(duì)較大;而用舊巢房繁蜂,因繭衣較厚空間較小,培育出的成蜂也小。個(gè)體較大的蜜蜂在生產(chǎn)能力和抗病性等方面都比個(gè)體小的蜜蜂具有優(yōu)勢(shì)。所以在巴西以及其他國(guó)家,蜂農(nóng)常利用較大房子L的巢礎(chǔ)來(lái)誘導(dǎo)產(chǎn)生大的巢房,從而培育出個(gè)體較大的蜜蜂,以提高蜂群的生產(chǎn)能力。我們的研究結(jié)果表明:螨在較小的巢房里繁殖力強(qiáng),在較大的巢房里繁殖力低。所以使用新脾或用較大的巢房繁殖蜜蜂,不僅可以獲得個(gè)體較大的蜜蜂,利于生產(chǎn),而且可以降低螨的繁殖力,使蜂群的抗螨性能增強(qiáng),對(duì)養(yǎng)蜂生產(chǎn)具有指導(dǎo)意義。
3.2 蜜蜂個(gè)體對(duì)大蜂螨的自身免疫能力一受螨害蜜蜂血淋巴蛋白含量及組分的改變
蜜蜂對(duì)于大蜂蠟的侵害除了群體的反應(yīng)之外,個(gè)體是否有所反應(yīng)呢?我們通過(guò)分析受螨害蜜蜂的血淋巴蛋白總量和組分,了解蜜蜂對(duì)大蜂螨侵害的免疫防御機(jī)能,從而豐富我們對(duì)于寄主與寄生蟲(chóng)相互斗爭(zhēng)機(jī)制的認(rèn)識(shí)。
3.2.1 方法 分別從購(gòu)自安徽黃山地區(qū)大蜂螨嚴(yán)重侵染的意蜂群和本所飼養(yǎng)健康意蜂群中采取幼年工蜂的血淋巴,用考馬斯亮蘭染色法測(cè)定血淋巴總蛋白含量;用高壓超薄層等電點(diǎn)聚焦法對(duì)血淋巴蛋白進(jìn)行分類。
3.2.2 結(jié)果與小結(jié) 意蜂個(gè)體對(duì)于大蜂螨的侵染能夠產(chǎn)生一定的防御能力,主要表現(xiàn)之一是血淋巴蛋白總量增高和血淋巴蛋白組分改變。
3.3 蜜蜂幼蟲(chóng)血淋巴氫墓酸及各種元素含量對(duì)大蜂螨寄生影響的初探
蜜蜂的血淋巴是蜜蜂機(jī)體的內(nèi)環(huán)境,血淋巴中含有蜜蜂生理活動(dòng)所必需的一切物質(zhì),具有復(fù)雜的組分及特性,擔(dān)負(fù)著多種生理功能。而大蜂螨是靠吸食蜜蜂的血淋巴生存的。試驗(yàn)證實(shí):大蜂螨體內(nèi)缺乏很多種生命活動(dòng)所必需的物質(zhì),對(duì)蠟而言,簡(jiǎn)便的辦法是直接利用寄主的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。比如,螨繁殖時(shí)直接利用意蜂的血淋巴蛋白,使卵子迅速發(fā)育,從而增加繁殖的有效性。另外蠟是卵胎生的生物,若螨出殼時(shí)需要蜜蜂血淋巴中的某些成分來(lái)轉(zhuǎn)化成一種外激素。因此推測(cè),蜜蜂血淋巴中某些物質(zhì)的存在、缺失和含量,與大蜂螨的寄生有直接的關(guān)系。
有關(guān)蜜蜂血淋巴成分與蜜蜂某些傳染病之間的關(guān)系已有報(bào)道。如梁勤教授(2002)檢測(cè)了中、意蜂幼蟲(chóng)血淋巴中游離氨基酸、礦物質(zhì)的成分和含量,以探討中、意蜂對(duì)蜜蜂白堊病抗性差異的原因。結(jié)果發(fā)現(xiàn)中蜂幼蟲(chóng)和意蜂幼蟲(chóng)血淋巴在游離氨基酸和礦物質(zhì)的含量上差異極顯著,并進(jìn)一步證明這些差異與中蜂對(duì)白堊病的抗性有關(guān)。蜜蜂幼蟲(chóng)血淋巴是大蜂螨生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖的喉一營(yíng)養(yǎng)來(lái)源。有趣的是大蜂螨在中蜂的工蜂房中不育。有關(guān)這種不育的假說(shuō)有多種,但是這種不育與蜜蜂血淋巴中游離氨基酸和礦物質(zhì)含量是否有關(guān)的報(bào)道還未見(jiàn)到。因此我們比較了中、意蜂封蓋幼蟲(chóng)血淋巴中多種游離氨基酸、礦物質(zhì)的含量,對(duì)蜜蜂幼蟲(chóng)血淋巴中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量與大蜂螨在中蜂工蜂房中不育的關(guān)系進(jìn)行探討性研究,以期為中蜂抗螨機(jī)制的進(jìn)一步研究提供資料。
3.3.1方法 蜜蜂幼蟲(chóng)血淋巴游離氨基酸測(cè)定:采用磺基水揚(yáng)酸法(日立835-50型全自動(dòng)氨基酸分析儀);蜜蜂幼蟲(chóng)血淋巴礦物質(zhì)含量測(cè)定:采用等離子體發(fā)射光譜法和等離子體質(zhì)譜法。
3.3.2結(jié)果與小結(jié)
3.3.2.1 四種蜜蜂幼蟲(chóng)血淋巴游離氨基酸含量的檢測(cè)結(jié)果
表3-3-1顯示:大蜂螨不能在其上繁殖的中華蜜蜂工蜂幼蟲(chóng)的血淋巴游離氨基酸含量明顯高于其它3種幼蟲(chóng),不但表現(xiàn)在單一氨基酸含量的增高,而且是昆蟲(chóng)體內(nèi)的必需和非必需氨基酸普遍明顯增高。也許正是這種增高影響大蜂螨的正常繁殖,或者血淋巴中游離氨基酸過(guò)高影響大蜂螨的嗜口性。這個(gè)有趣的結(jié)果有待于今后深入研究后解釋。
3.3.2.2四種蜜蜂幼蟲(chóng)血淋巴礦物質(zhì)含量測(cè)定結(jié)果
表3-3-2顯示:中蜂雄蜂幼蟲(chóng)的銅和鋅含量明顯高于其它3種幼蟲(chóng)。有研究證明銅和鋅與動(dòng)物的生殖有關(guān),動(dòng)物體內(nèi)銅、鋅元素低下,會(huì)引起生殖機(jī)能下降。楊冠煌教授2002年曾比較了意蜂和中蜂蛹期血淋巴中的5種元素的含量,,發(fā)現(xiàn)意蜂蛹的銅含量是中蜂蛹的2倍以上,他認(rèn)為這種現(xiàn)象可能和大蜂螨喜歡在意蜂蛹房中繁殖,及中蜂工蜂房中蠟卵滯育有關(guān)。我們的測(cè)定結(jié)果與楊教授的結(jié)果有相似之處,即大蜂螨喜歡在含銅和鋅高的幼蟲(chóng)房中繁殖。可以推論,銅和鋅是大蜂螨繁殖所必需的元素。由于昆蟲(chóng)學(xué)科在這方面的研究報(bào)道較少,因此要證實(shí)這些現(xiàn)象需要今后更深入的工作。
4 我國(guó)蜜蜂瓦螨的分類地位和自然種系(基因型)的分子遺傳學(xué)研究進(jìn)展
4.1 方法
蜜蜂瓦螨的分類研究對(duì)深層次地揭示其寄生、為害、發(fā)生流行規(guī)律和尋找更有效的防治方法具有重要意義。我們對(duì)采集自我國(guó)主要蜜蜂飼養(yǎng)區(qū)18個(gè)省市的意大利蜜蜂群和20個(gè)省市的中華蜜蜂群的大蜂螨樣本,進(jìn)行了mtDNA CO-I基因片段測(cè)序和DNA酶切片段多態(tài)性分析、鑒定。
4.2 結(jié)果與小結(jié)(見(jiàn)表4—1):
4.2.1 中國(guó)17個(gè)省市自治區(qū)的意蜂群寄生的都是狄斯瓦螨的朝鮮基因型。
4.2.2 在廣西寧明縣意蜂群中發(fā)現(xiàn)狄斯瓦螨的中國(guó)基因型,與廣東中蜂群的大蜂螨的基因型相同。很可能系偶爾侵入暫時(shí)棲身于意蜂群中的中蜂螨。
4.2.3不同地區(qū)中蜂群中的大蜂螨分別屬于狄斯瓦螨的不同基因型。
4.2.3.1 云南西雙版納的中蜂蠟屬于狄斯瓦螨的越南基因型;
4.2.3:2 廣東中蜂螨均屬于狄斯瓦螨的中國(guó)基因型;
4.2.3.3 貴州錦屏中蜂螨屬狄斯瓦蠟的中國(guó)基因型;
4.2.3.4 云南大姚縣的中蜂瓦螨樣品是在中國(guó)發(fā)現(xiàn)的一種新的基因型——中國(guó)2基因型;
4.2.3.5 福建永定縣、浙江、江西南昌、湖南平江的中蜂螨屬于狄斯瓦螨的朝鮮基因型;
4.2.3.6 DNA測(cè)序顯示:廣西寧明、甘肅臨潭的中蜂群寄生的狄斯瓦螨可能屬于新的基因型;
4.2.3.7 海南三亞、四川寶興和馬爾康的中蜂螨測(cè)序結(jié)果正在分析中。
4.2.4 先后對(duì)安徽歙縣、湖北崇陽(yáng)、江蘇無(wú)錫、北京房山的中蜂場(chǎng)進(jìn)行調(diào)查采集,均未能獲得大蜂螨樣本。
4.2.5 狄斯瓦螨各基因型之間遺傳生殖是隔離的。
4.2.6 我國(guó)無(wú)論中蜂和意蜂群中寄生的都是狄斯瓦螨,到目前為止中國(guó)還未發(fā)現(xiàn)雅氏瓦螨的存在。
經(jīng)過(guò)近6年的努力,到目前為止,已初步搞清我國(guó)大蜂蠟的分類地位,并對(duì)其自然種系的分布有了一個(gè)初步了解。雖然目前尚難以獲得我國(guó)中部和北部所有地區(qū)中蜂螨的樣本進(jìn)行全盤(pán)測(cè)定,但從已有的結(jié)果看,與我國(guó)東方蜜蜂資源多樣性相對(duì)應(yīng),中國(guó)東方蜜蜂寄生瓦螨的基因型也呈現(xiàn)中國(guó)特有的多態(tài)性。同時(shí),測(cè)定結(jié)果確定了浙江、江西等地的中蜂瓦螨為狄斯瓦螨的朝鮮基因型,而我國(guó)正是于1957年前后在養(yǎng)蜂發(fā)達(dá)的江浙地區(qū),即中蜂與意蜂頻繁接觸的省份和時(shí)期,首先在意大利蜂群中發(fā)現(xiàn)狄斯瓦螨朝鮮基因型的為害,這為我國(guó)意大利蜂蠟害的根源是來(lái)自上述地區(qū)中華蜜蜂狄斯瓦螨的寄主轉(zhuǎn)移,并隨之大范圍的地理擴(kuò)散所致的理論提供了可靠有力的證據(jù)。
此項(xiàng)狄斯瓦螨分類的分子遺傳學(xué)研究工作與國(guó)際蜂螨研究前沿接軌,并有可喜的創(chuàng)新。這將為進(jìn)一步闡明瓦螨與蜜蜂之間的生物地理學(xué)關(guān)系和人為造成的生態(tài)分布,以及蜜蜂大蜂螨的防治和中蜂抗蠟機(jī)制的研究都有重要意義。
5 常用殺螨劑的毒性研究
目前我國(guó)蜂群中應(yīng)用最廣泛的殺螨劑是雙甲脒和商品名為馬撲立克的氟胺氰菊酪。這兩種藥物的殺螨效果比較確實(shí),但對(duì)蜜蜂的毒性如何眾說(shuō)不一。上世紀(jì)80~90年代初國(guó)內(nèi)外曾有一些關(guān)于氟胺氰菊酯的毒性測(cè)定文章,但由于評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)不一致,結(jié)果差異很大,難以說(shuō)明問(wèn)題。因此,我們對(duì)雙甲脒和氟胺氰菊酪在蜂群中的毒性進(jìn)行了系統(tǒng)的評(píng)價(jià),這對(duì)于蜂群中殺螨劑的使用具有指導(dǎo)意義。
5.1 方法
5.1.1 根據(jù)資料提供的雙甲脒和氟胺氰菊酯毒性的文獻(xiàn)值(見(jiàn)表5-2-1),通過(guò)大量的室內(nèi)的毒力測(cè)定試驗(yàn),試驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用曲線概率法求得雙甲脒和氟胺氰菊酯的毒力回歸方程和LC50(見(jiàn)表5-2-2)。
5.1.2 根據(jù)雙甲脒和氟胺氰菊酯的毒力,確定蜂群慢性毒性測(cè)定的給藥劑量和試驗(yàn)天數(shù)。
5.1.3 試驗(yàn)蜂群為意大利蜂群,蜂王全部來(lái)自同一個(gè)母親王,蜂群試驗(yàn)持續(xù)21天。
5.1.4 測(cè)定雙甲脒和氟胺氰菊酯對(duì)蜜蜂繁殖力、幼蟲(chóng)發(fā)育、發(fā)育歷期、卵千粒重和幼蟲(chóng)的個(gè)體大小等影響,測(cè)定結(jié)果進(jìn)行差異比較。
5.2 殺螨劑對(duì)蜜蜂的毒力測(cè)定(LC50)結(jié)果
5.3 小結(jié)
5.3.1 本試驗(yàn)采用攝入法,雙甲脒和氟胺氰菊酯對(duì)蜜蜂毒力(LC50)的測(cè)定結(jié)果與文獻(xiàn)的記載一致(見(jiàn)表5-2-1、表5-2-2),屬于低毒獸藥。
5.3.2 雙甲脒和氟胺氰菊酯對(duì)蜜蜂繁殖力和發(fā)育的影響結(jié)果顯示:這兩種殺螨劑對(duì)蜜蜂的產(chǎn)卵具有顯著影響,特別是雙甲脒,5個(gè)試驗(yàn)組中有4個(gè)在21天試驗(yàn)過(guò)程中幾乎沒(méi)產(chǎn)卵,同時(shí)雙甲脒對(duì)于卵的孵化率也有顯著影響。
5.3.3 雙甲脒和氟胺氰菊酯對(duì)蜜蜂發(fā)育歷期的影響試驗(yàn)結(jié)果顯示:這兩種殺螨劑對(duì)蜜蜂的發(fā)育歷期沒(méi)有明顯的影響。
5.3.4 雙甲脒和氟胺氰菊酯對(duì)卵千粒重和幼蟲(chóng)個(gè)體大小的影響結(jié)果顯示:雙甲脒組蜜蜂卵的重量和幼蟲(chóng)體長(zhǎng)都顯著小于對(duì)照組;氟胺氰菊酪組的幼蟲(chóng)體重和體寬顯著小于對(duì)照組。
因此雙甲脒和氟胺氰菊酯作為殺螨劑用于蜜蜂螨害防治,對(duì)于蜜蜂具有一定的毒性作用,對(duì)蜜蜂的繁殖具有明顯影響。其中雙甲脒的毒性大于氟胺氰菊酯。因此建議蜂農(nóng)使用這兩種殺螨劑治螨時(shí),在使用時(shí)間、劑量上應(yīng)該加以注意。治螨應(yīng)在繁殖期和生產(chǎn)期之前或過(guò)后,否則不但會(huì)造成蜂產(chǎn)品污染,還會(huì)使蜂群群勢(shì)下降,影響生產(chǎn)。
引自《中國(guó)蜂業(yè)》2007(2、3)
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